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牛凍結精液の融解について
ストローの取出しと融解
●内圧によってストローが破裂したり、綿栓が抜けてストローが飛び出す等の危険があります。
タンクから取り出すときや温湯に投入するときはストローをできるだけ人体から離して取り扱い、融解中のぞき込むような動作をしないでください。
●ストローは1 本ずつ取出し、35～37℃の温水に45 秒以上浸けて完全に融解してください。
・ 外気が20℃以下の時はストローを注入直前まで温水に浸けて保管しても良い。
・ 温度計で融解器の水温を確認する。
・ 時計あるいはタイマーを用いてストローの温水への浸漬時間を確認する。
・ 紫外線は精子にダメージを与えるので、直射日光を避けて融解作業を行う。
●10 分以内（性選別精液は５分以内）に授精できる数のストローを融解してください。
●要領・手順（図1 を参照してください）
1: キャニスターをフロストライン（霜が付着した部位 図1-A）まで持上げ、指に挟み固定する。図1-B
・凍傷になる場合があるので、耐冷手袋の着用が望ましい。
2: 融解するストローが収納されているケインのタグ（種雄牛略号・番号）を確認する。
3: ケインをピンセットでタンクの外に出ない程度まで持上げ、指で保持する。図1-C
・ ストローはケイン上段に収納されているものから取り出す。
・ 下段から取出す時もストローがタンクの外に出ない程度にケインを引き上げる。
4: ケインの中からストローを1 本ずつピンセットで取出し、融解器の温水に投入する。
・ 温水に浸けたストローが破裂したり、綿栓が飛びだしたりする危険性があります。
・ 融解時にあたっては、安全ゴーグルを着用してください。ゴーグルを着用できない場合、体から離して融解し、のぞき込まないようにしてください。
5: ケインをキャニスターに戻し、キャニスターをタンク内に下ろす。
・ ケインは5 秒以内にキャニスターに戻す。
・ フロストラインまで持上げたキャニスターは10 秒以内に液体窒素タンク内に戻す。
※ストロー取り出しに時間がかかりそうな場合、一旦ケインとキャニスターをタンク内に戻して、30 秒以上経過したのち、作業を再開してください（図2 参照）。
図2 ストロー取り出し操作に伴うケイン上段の凍結精液の温度変化
精液融解時の操作と同様、キャニスターをフロストラインまで持上げて固定、ケインを液体窒素タンクの開口部まで引上げて5 秒保持したのち、キャニスター内に戻した。キャニスターはフロストラインまで持上げてから10 秒後にタンク内へ戻して30 秒静置したのち、再び同様の操作を行った。液体窒素量が約1/3 のタンク（容量11 リットル）を使用。
融解精液の取り扱い
●融解精液は寒冷・高温傷害を受けないように注意してください。
・ あらかじめ注入器やシース管を体温程度に温めてから融解したストローをセットする。
・ 20℃以上に温められた精子が10℃以下に急冷されると寒冷傷害をうけます（図3）。
・ 冬季にかぎらず20℃以下になる場合は、ストローをセットした注入器にシースカバーをつけて胸元あるいは保温器を用いて保温する。
・ 夏季は注入器などの器具が熱くなっていないか確認するとともに、注入器にセットしたストロー内の精子が高温傷害をうける可能性があるので、できるだけ速やかに注入する。
●融解後、10 分以内（選別精液は5 分以内）に注入してください。
・時間が経過すると、精子の運動性が低下します（図4）。
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